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我們直接看到DNA單分子

每個DNA在原始狀態下都是單分子,其中蘊藏生命的最真實信息。瀚海基因獨特的單分子熒光測序技術能夠直接看見單個的DNA分子,并對其進行測序和解碼。沒有PCR,沒有偏好。

單分子熒光測序是如何工作的?

核心技術

全內反射熒光顯微技術

單分子熒光測序采用高靈敏度寬視野的全內反射熒光(TIRF——total internal reflection fluorescence)顯微成像技術,可直接觀測到極微弱的堿基單分子熒光信號。通過精心設計的TIRF照明系統在芯片表面產生倏逝波,僅允許芯片表面200nm深度以內的熒光分子被激發,消除了光路中的絕大多數背景噪聲,因而能獲得極佳的信噪比以識別出單個堿基信號。

虛擬終止堿基

瀚海基因的“虛擬終止堿基”技術為合成測序過程提供更高的保真度和反應效率。這種類堿基在單個位置同時連接了終止結構和熒光標記,具有更加接近天然的酶反應活性位點。通過可精確單步控制的堿基延伸、合成終止、熒光激發過程之后,僅需一步切除,即可去除堿基修飾,允許下一輪的延伸和測序。

單分子堿基識別

DirectCall是專門為單分子熒光測序定制的堿基識別算法,能夠精確的檢測、定位、配準和識別單個堿基信號。DirectCall不僅避免了傳統二代測序中相位不一致和GC偏好的頑疾,并且在現有的單分子測序領域可實現目前最高的測序準確率。

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